科导超声波 SK7200H SK3300BT

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科导超声-以超声-微波协同提取的桑叶多糖

[导读]为研究大孔树脂分离和纯化桑叶多糖的最佳工艺及抑菌活性。以超声-微波协同提取的桑叶多糖为原料,考察8种不同类型大孔树脂的比吸附量、吸附率及解吸率,筛选出最佳纯化树脂类型为AB-8,对其吸附和解吸条件进行考察和优化,经过单因素试验,确定最优纯化工艺参数,并用牛津杯法考察桑叶多糖纯化前后的抑菌效果。

  桑叶, 又名神仙叶、 铁扇子, 是桑科落叶乔木桑(Morus alba L.)的干燥叶子,在我国分布广泛。《中国药典》记载桑叶具有疏风散热、润肺清燥、清肝明目等功效,主要用来预防和祛除风热感冒、燥咳肺热、头痛头晕和目赤昏花等病症。 研究发现,桑叶具有独特的药用价值,如抗病毒、抗衰老、抗疲劳、抗血栓、降血压、抗肿瘤以及降血糖血脂等作用。 多糖作为桑叶的主要成分之一,具有抗凝血、抗氧化、降血糖等多种作用,近年来对桑叶多糖的研究比较多,主要集中在桑叶多糖提取工艺的优化、不同品种桑叶中多糖含量的比较、不同时间段采摘的桑叶中多糖含量的比较以及桑叶多糖提取分级及其抗辐射氧化胁迫作用等,对桑叶多糖的纯化研究较少。

  大孔树脂是一种稳定的极性、非极性或微亲水性聚合物,具有较高的吸附容量,较好选择性,可回收的吸附高分子聚合物,且成本相对较低,易于再生。目前,它们多用于植物中多糖、多酚、黄酮或者色素等的分离纯化,但尚未见桑叶多糖提取后利用大孔树脂纯化研究及抑菌活性评价的报道。本文将桑叶多糖经超声-微波协同提取后,用AB -8、X -5、LS -8、HPD -100、DA -201、NKA -9、ADS -17、HP20 这 8 种不同类型的大孔树脂, 通过对桑叶多糖的比吸附量、吸附率及解吸率的测定,为桑叶多糖的制备与分离提供一种有效的方法,同时对桑叶多糖纯化前后的抑菌作用进行研究,为桑树及桑叶资源的深度开发利用提供理论依据。

材料与方法

材料与试剂

桑叶:2018 年 11 月采摘于信阳农林学院,经信阳农林学院中药教研室梁丽香副教授鉴定为桑(Morusalba L.)的成熟叶片;葡萄糖标准品:合肥博美生物科技有限责任公司;蒽酮:上海展云化工有限公司;大孔树脂山东鲁抗立科药物化学有限公司;浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、乙醇(分析纯):武汉市中天化工有限责任公司;琼脂粉(分析纯):北京亚米生物科技有限公司;大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌:信阳农林学院微生物实验室;所有试验用水均为二次重蒸水。

仪器与设备

UV-1600 型紫外-可见分光光度计: 上海美普达仪器有限公司;ME104 型电子分析天平: 瑞士梅特勒公司;HG101-3A 型电热鼓风干燥箱:南京卓鼎干燥设备厂;400Y 型多功能粉碎机: 永康市铂欧五金制品有限公司;RE-52AA 型旋转蒸发器: 上海亚荣生化仪器厂;DKZ-2B 型电热恒温振荡水槽:上海精宏实验设备有限公司;RWBC-08S 型微波萃取反应仪: 南京苏恩瑞实验仪器有限公司;SK7200HP超声波清洗器上海科导超声仪器有限公司;SPX-70BE 生化培养箱、XFS-280A 型高压灭菌锅:上海力辰仪器科技有限公司;层析柱[20 mm(15 mm)×200 mm]:江阴市新辉层析设备有限公司。

试验方法

桑叶多糖的粗提

将干燥桑叶粉碎,过 60 目筛,取 20 g 置于 500 mL烧杯中,加入 400 mL 蒸馏水,将混合液于 80 ℃热水中浸提 3 h 后置超声波清洗器中,超声功率 80 W,超声时间 20 min, 超声结束后进行微波萃取, 微波功率140 W,微波时间 3 min,冷却至室温(25 ℃)后过滤得提取液。 然后将提取液旋转浓缩,缓慢加入无水乙醇使最后乙醇体积分数为 80%,搅拌混匀后 4 ℃下静置40 min,离心 10 min,收集沉淀物,干燥备用。

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