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科导超声-解决中药质量控制指标与药效研究

[导读]传统的植物化学方法强调分离纯化化合物,而不是对中药的混合体系直接进行全面定性、定量分析,导致越纯的化合物不一定有药效,且耗费大量的人力、物力,仍未阐明中药的药效组分。

高良姜为姜科植物高良姜 Alpinia officinarumHance. 的根茎,为常用中药材,具有抗溃疡、抗腹泻、镇痛抗炎、抗血栓、抗氧化、抗菌、抗癌等广泛的药理作用,具有重要药用价值。高良姜化学成分复杂,主要包括二芳基庚烷类、挥发油类、苯丙素类和黄酮类等。在探寻治疗白癜风的维药时发现高良姜有效部位能够促进黑素生成,具有治疗白癜风的作用。故本实验制备含不同质量分数高良姜素的高良姜提取物,并建立相应的指纹图谱,同时采B16 小鼠黑素瘤细胞对各提取物的促黑素生成作用进行体外药效学评价,采用灰关联度分析法分析其谱效关系,并进行光谱、色谱、质谱比对,筛选高良姜促黑素生成的活性物质。
材料
药物与试剂
高良姜(批号 20090321),新疆华康药业有限责任公司,经新疆自治区药物研究所张彦福研究员鉴定为姜科植物高良姜 Alpinia officinarum Hance.的干燥根茎。高良姜醇提物(G1)、G1 水沉物(G2)、G2 大孔树脂纯化物(G3)、G3 聚酰胺精制物(G4均为自制[5](分别含高良姜素 27.6188.72348.53693.35 mg/g)。高良姜素对照品,批号 090217,质量分数 99%,上海融禾医药科技公司;8-甲氧基补骨脂素(8-MOP),东京化成工业株式会社。甲醇、乙腈为色谱纯,美国 Fisher 公司;优级纯磷酸,天津市风船化学试剂科技有限公司;DMEM 干粉培养基,美国 Gibco 公司;胎牛血清,美国 Hyclone 司;台盼蓝、胰酶、TritonX-100Scientific ResearchSpecial 公司;四甲基偶氮噻唑蓝,美国 Amresco 司;七水磷酸氢二钠、一水磷酸二氢钠,上海生工生物工程有限公司;二甲基亚砜(DMSO),天津市光复化工研究所;水为超纯水。
 仪器
  LC 2010 高效液相色谱仪,美国 Waters 公司;VPODS 色谱柱,日本岛津公司;4000 QTRAP 子肼串联质谱仪,美国应用生物系统公司;BS224S分析天平,德国 Sartorius 公司;SK8210HP 超声清洗器,上海科导超声仪器有限公司PHS25 pH 计,上海雷磁仪器厂;LDZX75KBS 立式压力蒸汽灭菌器,上海申安医疗器械厂;YJ875 净化工作台,上海苏达实验仪器厂;MCO18AIC CO2 培养箱、MDF192 超低温冰箱,日本 Sanyo 公司;XD101倒置显微镜,中国江南光电仪器有限公司;MM3微量振荡器,江苏沈高康健生化器具厂;BIORAD550 型酶标仪,美国伯乐公司;DHG9123A 电热恒温鼓风干燥箱,上海精宏实验设备有限公司; SHZ2A 水浴恒温振荡器,上海梅香仪器有限公司。 细胞 B16 小鼠黑素瘤细胞,上海中科院细胞库提供。

  中药是一个很复杂的“黑色”或“灰色”多组分体系。传统的植物化学方法强调分离纯化化合物,而不是对中药的混合体系直接进行全面定性、定量分析,导致越纯的化合物不一定有药效,且耗费大量的人力、物力,仍未阐明中药的药效组分。指纹图谱研究的高级阶段是对图谱中的指纹峰进行系统的指认以及指纹特征和药效相关性研究,即谱效关系、指纹图谱的生物等效性研究等。这种包括了体现药效信息的多个有效部位的各种指纹图谱,将进一步解决如何体现中药及其制剂的整体性和复杂性的难题,同时能够建立一种合理、有效的中药内在品质的研究和评价方法,并解决中药质量控制指标与药效研究相脱节的问题,因此中药指纹图谱是中药现代化研究的重要组成部分,是表征中药所含成分与其质量关系的有效手段,已成为国内外广泛接受的中药质量评价模式。

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